کشت سلول های بنیادی مزانشیمی موش صحرایی: استفاده از پلاسمای تهیه شده از خون محیطی به عنوان مکمل محیط کشت

Authors

محمدرضا باغبان اسلامی نژاد

m.r. eslaminejad استادیار پژوهشکده رویان لیلا روحی

l. rouhi دانشگاه تهران سید محمود عرب نجفی

s.m. arab najafi دانشگاه تهرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (tehran university) حسین بهاروند

h. baharvand دانشگاه تهرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (tehran university)

abstract

چکید ه   سابقه و هدف   در دستورالعمل های رایج جداسازی و تکثیر سلول بنیادی مزانشیمی، استفاده از سرم جنینی گاو( fcs ) به عنوان مکمل محیط کشت، اجتناب ناپذیر است. این در حالی است که سرم جنینی گاو در انسان ایمونوژنیک بوده و به هنگام پیوند خطر انتقال عفونت را با خود به همراه دارد. لذا به دنبال یک جانشین مناسب برای سرم جنینی گاو، در مطالعه حاضر، تاثیر پلاسمای تهیه شده از خون محیطی بر رشد سلول های بنیادی مزانشیمی بررسی شده است.   مواد وروش ها   مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. سلول های مغز استخوان تهیه شده از استخوان های دراز موش صحرایی، از کشت اولیه تا پاساژ سوم با استفاده از محیط کشت حاوی fcs و پلاسمای تهیه شده از خون محیطی موش صحرایی کشت شدند و حاصل هر مرحله از کشت که در اصل به ترتیب سلول های پاساژ اول تا چهارم محسوب می شوند، از لحاظ میزان دو برابر شدگی جمعیت سلولی، توان زیستی و تکثیر سلولی به ترتیب با روش های شمارش سلولی، آزمایش mtt و رسم منحنی رشد اندازه گیری شد. سلول های حاصل از کشت اولیه از لحاظ کلون زایی نیز بررسی شدند. هر مطالعه 10 بار تکرار شد و میانگین نتایج، مقایسه آماری شد. در پایان سلول های پاساژ سوم از لحاظ پتانسیل تمایز به استخوان و چربی با روش رنگ آمیزی اختصاصی rt-pcr بررسی شدند.   یافته ها   سلول های کشت شده در پلاسما از لحاظ مورفولوژی، تقریباًَ یک دست دوکی شکل بودند در حالی که در کشت سلول های گروه fcs ، تعدادی سلول غیر دوکی شفاف نیز مشاهده شد. در مجموع، از لحاظ دو برابر شدگی جمعیت سلولی و آزمایش mtt ، سلول های گروه fcs به طور معنی داری وضعیت بهتری داشتند ولی تفاوت ها در سلول های حاصل از پاساژ سوم از لحاظ آماری معنی دار نبود. در منحنی رشد، در طول دوره کشت، طول و شیب فازهای نمودار در دو گروه مشابه بود ولی گروه fcs ، رشد بیشتری از خود نشان داد. سلول های گروه پلاسما تعداد بیشتری کلون تولید کردند ولی اندازه این کلون ها در مقایسه با سلول های گروه fcs کمتر بود. سلول های هر دو گروه به راحتی به دودمان های آدیپوژنیک و استئوژنیک تمایز یافتند. زیرا سلول ها به ترتیب با اویل رد و آلیزارین رد رنگ شدند و ژن های ppar-gama ، ppar-alpha و c/ebp-alpha برای چربی و استئوکلسین و استئوپونتین برای استخوان بیان شد.   نتیجه گیری   روی هم رفته می توان گفت که پلاسما به عنوان جایگزین سرم گاو قادر است از تکثیر سلول بنیادی مزانشیمی حمایت کرده و توان زیستی آن را حفظ نماید، اگر چه این حمایت، در مقایسه با fcs تا حدودی کمتر است ولی در عوض جایگزین سالمی محسوب می شود.   کلمات کلیدی : سلول های بنیادی مزانشیمی موش، پلاسما، تکثیر سلولی

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

کشت سلول‌های بنیادی مزانشیمی موش صحرایی: استفاده از پلاسمای تهیه شده از خون محیطی به عنوان مکمل محیط کشت

  چکید ه   سابقه و هدف   در دستورالعمل‌های رایج جداسازی و تکثیر سلول بنیادی مزانشیمی، استفاده از سرم جنینی گاو( FCS ) به عنوان مکمل محیط کشت، اجتناب ناپذیر است. این در حالی است که سرم جنینی گاو در انسان ایمونوژنیک بوده و به هنگام پیوند خطر انتقال عفونت را با خود به همراه دارد. لذا به دنبال یک جانشین مناسب برای سرم جنینی گاو، در مطالعه حاضر، تاثیر پلاسمای تهیه شده از خون محیطی بر رشد سلول‌های بن...

full text

بررسی لقاح و کشت جنین گاوی در سیستم هم کشتی سلول های بنیادی مزانشیمی موش صحرایی

سابقه و هدف: یکی از پرکاربردترین منابع سلولی در مهندسی بافت و بهینه‌سازی محیط‌های کشت، سلول-های بنیادی مزانشیمی(MSCs) می‌باشد. در مطالعه حاضر، سلول‌های بنیادی موش به عنوان هم‌کشتی مورد استفاده قرار گرفت. از آنجاییکه مشکل عمده روش کشت جنین در شرایط آزمایشگاهی قابلیت حیاتی کاهش یافته جنین‌های آزمایشگاهی در مقایسه با همتاهایشان در شرایط حیاتی است، هدف از این مطالعه ارزیابی لقاح و کشت جنین گاوی در ...

full text

بررسی اثر محیط کشت حاصل از سلول های بنیادی مزانشیمی انسانی بر آسیب حاد کلیوی ناشی از جنتامایسین در موش صحرایی

هدف: هدف از انجام این تحقیق بررسی اثر فاکتورهای ترشحی سلول‏های بنیادی مزانشیمی انسانی بر آسیب حاد کلیوی ناشی از جنتامایسین در موش صحرایی می‏باشد.   مواد و روش‏ها‏: در این تحقیق ابتدا آزمایشی جهت دستیابی به مدل حیوانی استاندارد طراحی شد. سپس حیوانات به‏طور تصادفی به چهار گروه تقسیم شدند. یک گروه به‏عنوان کنترل در نظر گرفته شد که هیچ تزریقی در حیوانات این گروه صورت نگرفت، سه گروه دیگر جنتامایسین...

full text

بررسی اثر محیط کشت حاصل از سلول های بنیادی مزانشیمی انسانی بر نارسایی حاد کلیوی ناشی از سیس پلاتین در موش صحرایی

هدف: سیس پلاتین یکی از موفق‏ترین داروها برای مقابله با بسیاری از سرطان‏ها است، اما میزان سمیت حاد کلیوی بالای آن، تجویز این دارو را محدود می‏کند. هدف از انجام این تحقیق بررسی اثر فاکتورهای ترشحی سلول‏های بنیادی مزانشیمی انسانی بر نارسایی حاد کلیوی ناشی از سیس پلاتین در موش صحرایی می‏باشد. مواد و روش‏ها: در این مطالعه از موش صحرایی نر، نژاد ویستار استفاده شد. حیوانات به‏طور تصادفی به چهار گروه ...

full text

جداسازی سلول‌های بنیادی مزانشیمی از مغز استخوان موش با تعویض مداوم محیط کشت

Background: MSCs have been isolated from a variety of mammals by the plastic adherence method. However, this method can be problematic due to the unwanted growth of hematopoietic cells and non-MSCs. The potential of MSCs to differentiate along multiple lineages is the key to the identification of stem cell populations in the absence of molecular markers. In the present study, we describe a homo...

full text

سلول های بنیادی مزانشیمی با توان تکثیر بالا در محیط رویی کشت اولیه مغز استخوان موش صحرائی

سابقه و هدف: در کشت مغز استخوان به منظورجداسازی سلول های بنیادی مزانشیمی، معمولا سلولهای شناور در محیط کشت اولیه با تعویض محیط، دور ریخته می شود. هدف تحقیق حاضر کشت و تکثیراین سلول ها، بررسی ماهیت بنیادی مزانشیمی آنها، مقایسه سرعت رشد آنها با سلول های چسبنده کشت اولیه و بالاخره بهینه سازی شرایط کشت برای رشد بهتر این سلول هاست.مواد و روشها: در مطالعه تجربی حاضر تعداد 10 سر موش صحرایی نژاد ویستار...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
فصلنامه پژوهشی خون

جلد ۵، شماره ۱، صفحات ۲۵-۳۷

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023